eBlot L1快速濕轉(zhuǎn)儀基于濕轉(zhuǎn)的原理,集合了傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)穩(wěn)定、均勻和半干轉(zhuǎn)快速、高效的優(yōu)勢,同時避免了傳統(tǒng)濕轉(zhuǎn)耗時費力和半干轉(zhuǎn)不均勻穩(wěn)定性差的缺點,能夠在9-17分鐘內(nèi)快速高效地實現(xiàn)蛋白從聚丙烯酰胺凝膠轉(zhuǎn)移到PVDF膜或NC膜上的過程。
儀器使用經(jīng)過嚴(yán)格優(yōu)化的轉(zhuǎn)膜液和平衡液,能夠確保大小蛋白同時高效轉(zhuǎn)膜。無論從轉(zhuǎn)膜的均一性、寬廣的蛋白分子量大小和超低蛋白含量上都實現(xiàn)轉(zhuǎn)膜效果。
eBlot L1快速濕轉(zhuǎn)儀操作步驟:
1、轉(zhuǎn)一張膜需準(zhǔn)備2張6.5*10cm的濾紙和1張5.5*8.5cm的PVDF膜。切濾紙和膜時一定要戴手套,因為手上的蛋白會污染膜。將切好的PVDF膜浸于甲醇中不少于15分鐘才可使用。
2、在加有轉(zhuǎn)移液的搪瓷盤里放入轉(zhuǎn)膜用的夾子、兩塊海綿墊、兩張濾紙和浸過的PVDF膜。
3、打開夾子將黑的一面放入轉(zhuǎn)膜液中,從下往上依次放入海綿、濾紙、分離膠、PVDF膜、濾紙、海綿。
4、將夾子合好,放到轉(zhuǎn)移槽槽中,要使夾的黑面對槽的黑面,夾的白面對槽的紅面。接通電電轉(zhuǎn)移時會產(chǎn)熱,在槽的一邊有較大空隙,放入事先準(zhǔn)備好的冰盒來降溫。將整個電泳槽放入一個大的容器中,在這個容器中盛滿冰。
eBlot L1快速濕轉(zhuǎn)儀注意事項:
1、在轉(zhuǎn)膜液中進行整個過程,在鋪每一層時,氣泡要用刮子趕掉,一定不能有氣泡留在膠與膜之間。
2、要輕輕地撬玻璃板剝膠,用刮子輕輕刮去濃縮膠,將分離膠小心剝下,往濾紙上蓋,用手調(diào)整使其與濾紙對齊。