血清的質(zhì)量對實驗成敗起著關(guān)鍵性作用，但血清使用不當(dāng)也可能會導(dǎo)致血清質(zhì)量下降，造成細(xì)胞培養(yǎng)效果不理想。AusgeneX澳洲胎牛血清很珍貴，大家在血清使用時怎樣確定血清使用濃度？

　　

　　這個只能通過測試了。原則上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔。部分細(xì)胞原代提取時會使用20%血清，大部分細(xì)胞正常培養(yǎng)時會使用5%～10%的血清濃度。至于某一株細(xì)胞適應(yīng)什么樣的血清濃度，還需要根據(jù)細(xì)胞特性、實驗?zāi)康淖鰷y試和調(diào)整。

　　

　　血清使用前需要離心嗎？這個問題有以下兩種可能：

　　

　　其一，因為血清融解后有“絮狀物”析出。

　　

　　如果沒有出現(xiàn)其他異常情況，或者血清只是用于細(xì)胞培養(yǎng)，那么*沒有必要離心去除。我們知道血清析出的“絮狀物”主要是血纖蛋白，其在血清中含量很高，而且高度不溶，在血清凍融過程中很容易析出，但它也是*無害的，甚至能促進(jìn)細(xì)胞生長。

　　

　　另外，它還增強了AusgeneX澳洲胎牛血清的黏性，為細(xì)胞提供了額外的機械緩沖。在其析出過程中，會粘附培養(yǎng)體系中其他成分，離心去除，反而會損失營養(yǎng)成分。

　　

　　其二，實驗要求純凈的培養(yǎng)體系。

　　

　　培養(yǎng)的細(xì)胞需要進(jìn)一步鑒定，如免疫熒光、流式、共聚焦拍照等，細(xì)胞表面如果有黏性較強的血纖蛋白，勢必會影響效果。

　　

　　那么，建議400g離心5min即可。如果需要進(jìn)行精密實驗，如分離外泌體等，那么就需要至少100000g離心1.5h以上。